用戶真實(shí)反饋：科研大咖的“真香"體驗(yàn)

“CD3被敲低了80%多！你們這試劑的確有點(diǎn)東西！我做原代的，每次都得敲，以后我要長期回購！"

這條來自一線科研人的反饋，印證了ProteanFect CRISPRMax的硬核實(shí)力。無論是基因敲除、點(diǎn)突變還是大片段插入，這款試劑盒均能穩(wěn)定輸出高效結(jié)果。

今天，我們?yōu)槟鷰硪豢罡锩援a(chǎn)品——ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯轉(zhuǎn)染試劑盒。它憑借非病毒、非電轉(zhuǎn)、非脂質(zhì)體的獨(dú)·特技術(shù)，輕松實(shí)現(xiàn)原代細(xì)胞80%以上的基因編輯效率，成為國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室的“明星工具"！

產(chǎn)品核心優(yōu)勢(shì)：為何選擇ProteanFect CRISPRMax？

1. 專為原代與難轉(zhuǎn)細(xì)胞設(shè)計(jì)，效率突破瓶頸

原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率高達(dá)80%+：用戶實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)顯示，人原代Treg細(xì)胞中CD3基因敲低效率超過80%，與說明書中的流式數(shù)據(jù)（86% CD3陰性率）高度一致。

難轉(zhuǎn)細(xì)胞系的救星：無論是懸浮細(xì)胞還是貼壁細(xì)胞，均能穩(wěn)定遞送Cas9 mRNA和sgRNA，共表達(dá)率超90%。

2. 安全無憂：非病毒、無毒性、零殘留

基于自組裝蛋白納米顆粒技術(shù)，無需病毒載體或脂質(zhì)體，避免基因組整合風(fēng)險(xiǎn)，顯著降低細(xì)胞毒性。

轉(zhuǎn)染后細(xì)胞活力恢復(fù)快，第二天即可正常培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)周期大幅縮短。

3. 操作極簡，節(jié)省成本

預(yù)混試劑+明確步驟：只需按表配置Reagent A/B/C，孵育后即可完成轉(zhuǎn)染。

無需耗費(fèi)高成本構(gòu)建基因敲除鼠，直接實(shí)現(xiàn)T細(xì)胞穩(wěn)定基因高效敲除。

技術(shù)揭秘：蛋白納米顆粒如何實(shí)現(xiàn)高效遞送？

ProteanFect CRISPRMax的核心在于其自組裝蛋白納米顆粒技術(shù)：

高效負(fù)載：帶正電的納米顆粒通過靜電作用吸附Cas9 mRNA和sgRNA，形成穩(wěn)定復(fù)合物。

精準(zhǔn)遞送：復(fù)合物通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞后，迅速釋放核酸，避免溶酶體降解。

安全釋放：無需依賴病毒或脂質(zhì)體的膜融合機(jī)制，減少細(xì)胞損傷。

實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證：

靶向人TRAC基因的sgRNA轉(zhuǎn)染原代T細(xì)胞后，TIDE測(cè)序顯示編輯效率達(dá)88.5%，與流式結(jié)果高度吻合。

EGFP mRNA共轉(zhuǎn)染陽性率超90%，輕松監(jiān)控轉(zhuǎn)染效果。

數(shù)據(jù)分享：高效基因編輯，從ProteanFect開始

使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯轉(zhuǎn)染試劑盒轉(zhuǎn)染人原代 T 細(xì)胞，使用試劑盒中的 human TRAC-sgRNA 陽性對(duì)照敲除 TRAC 基因。在轉(zhuǎn)染 72 小時(shí)后，收集細(xì)胞，在蛋白水平（圖 1）和 DNA 水平（圖 2）檢測(cè)基因敲除的效率。

圖 1. 使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯轉(zhuǎn)染試劑盒編輯人原代 T 細(xì)胞中 TRAC基因后，TCR 蛋白表達(dá)的流式檢測(cè)結(jié)果。流式結(jié)果顯示，陽性對(duì)照組中約 86%的 T 細(xì)胞為 CD3陰性，表明該試劑盒同時(shí)遞送 Cas9 mRNA/sgRNA，總細(xì)胞群中約有 86%細(xì)胞的 TRAC 基因被成功編輯。

圖 2.使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯轉(zhuǎn)染試劑盒編輯人原代 T 細(xì)胞中 TRAC 基因的測(cè)序分析結(jié)果。收集轉(zhuǎn)染后的總細(xì)胞提取基因組 DNA，對(duì)靶點(diǎn)位置 PCR 擴(kuò)增（正向引物序列：GCAGTATTATTAAGTAGCCCT，反向引物序列：AACAAGGCTCACTGTTTCTT）并進(jìn)行Sanger 測(cè)序，通過 TIDE 對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行分析，結(jié)果顯示陽性對(duì)照組中靶點(diǎn)基因被編輯的比例約為 88.5%，與流式檢測(cè)蛋白水平的敲除結(jié)果（CD3-TCR 流式陰性比例）相當(dāng)。

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